Hemorphin 7 reflects hemoglobin proteolysis in Abdominal Aortic Aneurysm.  

Tiphaine de Jouvencel (1), Delphine Féron (2), Jean-Marie Piot (2), Jean-Baptiste Michel (1), Ingrid Fruitier-Arnaudin (2) and Olivier Meilhac (1).

Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2009 Nov 12.

(1)Inserm, U698, Paris, F-75018 France; Univ Paris 7, Paris, F-75018 France ; CHU X-Bichat, Paris, F-75018, France.
(2)  University of La Rochelle CNRS-ULR, UMR 6250, LIENSS, Univ La Rochelle, La Rochelle, F-17042, France.


Un marqueur du thrombus mural de l’AAA a été mis en évidence par Tiphaine de Jouvencel – Doctorante à l’Unité 698. Ce marqueur a été identifié par Julie Le Faouder - Ingénieur protéomique ICB. Ce travail illustre la complémentarité des deux structures.

Objectifs : L'anévrisme de l'aorte abdominal chez l'homme (AAA) se caractérise par une perte du parallélisme des bords et la présence d’un thrombus mural. Nous avons identifié par protéomique différentielle un marqueur du thrombus mural de l'AAA.

Méthodes : Nous avons réalisé une incubation des échantillons d'AAA séparés en média et adventice pour la paroi et en trois couches pour le thrombus (luminale, intermédiaire et abluminale) dans du milieu de culture. Des incubats d'aorte saine, préparés selon la même méthode (média et adventice), ont été utilisés comme contrôles. Les sécrétomes ainsi obtenus ont été analysés en spectrométrie de masse après fractionnement sur différentes surfaces chromatographiques (technique SELDI-TOF : Surface-Enhanced Laser Desorption/ionization  Time of Flight).

Résultats : L'analyse de milieux conditionnés par SELDI-TOF nous a permis d'isoler, sur barrette en phase inverse (H4), le pic correspondant à la LVV-Hémorphine 7 (issu de la protéolyse de la chaîne β de l'hémoglobine  par la cathepsine D). Sa séquence a été obtenue en MALDI(TOF)² (Institut Claude Bernard, Institut Jacques Monod, Paris 7). Il décrit un gradient décroissant de la lumière à la couche la plus interne du thrombus. Il est significativement plus exprimé dans la média des aortes anévrismales en comparaison à des aortes saines. L'hémoglobine et la cathepsine D suivent la même distribution. Sur des coupes d'aorte, les immunomarquages de LVV-Hémorphine 7, d'hémoglobine, de cathepsine D et des cellules inflammatoires nous a permis d'observer une colocalisation de LVV-Hémorphine 7 et de la cathepsine D, notamment présente dans les neutrophiles. Un effet chimiotactique du peptide sur les neutrophiles a étédémontré et son dosage sérique est actuellement évalué.

Conclusions : Ce peptide reflète la présence de l'hémoglobine et une protéolyse intense dans le thrombus d’AAA. Il met en relief le phénomène de convection vers la paroi aortique où il s’accumule. Ses possibles effets sur les cellules de l'adventice restent à évaluer.

Par ailleurs, il a été détecté dans les plaques d’athérosclérose hémorragiques en plus grande quantité en comparaison aux plaques non hémorragiques et aux zones adjacentes plus saines.